南瓜子房注射法遗传转化的研究
张言朝,葛宇,于杨,徐文龙,白玉娇,崔崇士,屈淑平
东北农业大学园艺学院,黑龙江哈尔滨 150030
Studies on Pumpkin Genetic Transformation Mediated by Ovary Injection
ZHANG Yan-chao,GE Yu,YU Yang,XU Wen-long,BAI Yu-jiao,CUI Chong-shi,QU Shu-ping*
Horticulture College of Northeast Agricultural University,Harbin 150030,Heilongjiang,China
摘要 以南瓜品种银辉1号为受体材料,用子房注射法对148个南瓜子房进行aiiA基因的遗传转化处理,共收获115个单瓜,结实率为77.7%。随机抽取56个单瓜,经0.2% Basta水溶液筛选和PCR鉴定,鉴定出7株阳性植株,均来自1个单瓜。再经PCR-Southern Blot鉴定,结果显示均有杂交信号,表明aiiA基因已经整合到银辉1号南瓜基因组DNA中,转化率为0.25%,单瓜转化率为6.36%。
关键词 :
南瓜 ,
子房注射 ,
PCR-Southern Blot鉴定 ,
转基因
Abstract :Taking pumpkin(Cucurbita moschata Duch.?ex Poir.)variety‘Yinhui No.?1’as receptor,aiiA gene was transferred into 148 pumpkin ovaries by injection.115 fruits were obtained with 77.7% seed setting percentage.Then 56 fruits were randomly selected,screened by 0.2% Basta aqueous solution and PCR identification.Finally,7 positive plants were all from one single fruit and all of them showed the hybridization signals by PCR-Southern Blot identification.The result indicated that the aiiA gene had been integrated into the genomic DNA of pumpkin‘Yinhui No.?1’with a converting rate of 0.25% and the converting rate per fruit was 6.36%.
Key words :
Pumpkin
Ovary injection
PCR-Southern Blot identification
Gene transfer
收稿日期: 2012-02-22
出版日期: 2012-04-05
基金资助: 黑龙江省高校创新团队项目(2009TD07-6)
通讯作者:
屈淑平,女,教授,硕士生导师,专业方向:蔬菜作物分子育种,E-mail:qushuping@ sohu.com
作者简介 : 张言朝,男,硕士研究生,专业方向:蔬菜作物分子育种,E-mail:zx462@163.com
引用本文:
张言朝,葛宇,于杨,徐文龙,白玉娇,崔崇士,屈淑平. 南瓜子房注射法遗传转化的研究[J]. 中国蔬菜, 2012, 1(16): 27-31.
ZHANG Yan-chao,GE Yu,YU Yang,XU Wen-long,BAI Yu-jiao,CUI Chong-shi,QU Shu-ping*. Studies on Pumpkin Genetic Transformation Mediated by Ovary Injection. , 2012, 1(16): 27-31.
链接本文:
https://www.cnveg.org/CN/ 或 https://www.cnveg.org/CN/Y2012/V1/I16/27
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