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甜瓜N- 乙酰氨基葡萄糖基转移酶基因(CmGnT)RNA 干扰载体的构建 |
张瑞腾1,2,付秋实2,马太光1,郭秀霞1,李灵芝1,郭仰东3,王怀松2*,李海平1* |
(1 山西农业大学园艺学院,山西太谷 030801;2 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京 100081;3 中国农业大学园艺学院,北京 100193) |
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摘要 为探讨甜瓜N- 乙酰氨基葡萄糖基转移酶基因(CmGnT)的功能,选取甜瓜CmGnT 基因保守序列,利用特异性引物 PCR 扩增得到一段 238 bp 的干扰片段。利用 Swa I 单酶切将正向片段亚克隆到质粒载体 pFGC1008 的 35S 启动子与 GUS之间,利用Spe I 单酶切将反向片段亚克隆到质粒载体 pFGC1008 的 GUS 与终止子之间,构建了RNAi 表达载体 pFGC1008-CmGnT。通过冻融法将其转入根癌农杆菌 C58 中,菌液 PCR 验证表明 RNAi 表达载体 pFGC1008-CmGnT 构建成功并成功转入农杆菌。为进一步研究甜瓜CmGnT 基因功能及甜瓜分子育种奠定重要基础。
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关键词 :
甜瓜,
CmGnT 基因,
RNA 干扰,
载体构建
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通讯作者:
李海平,男,副教授,硕士生导师,主要从事蔬菜栽培生理和生物技术研究,E-mail:lihp0205@163.com;王怀松,男,研究员,硕士生导师,主要从事蔬菜遗传育种研究,E-mail:wanghuaisong@caas.cn
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作者简介: 张瑞腾,男,硕士研究生,主要从事蔬菜栽培生理和生物技术研究,E-mail:rtzhang726@163.com |
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