番茄黄化曲叶病毒的实时荧光定量PCR 检测
林 铭 胡 鸿* 杜永臣 高建昌 王孝宣 国艳梅
中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081
Real-time PCR for Quantification of Tomato yellow leaf curl virus in Tomato
Plants
LIN Ming，HU Hong*，DU Yong-chen，GAO Jian-chang，WANG Xiao-xuan，GUO Yan-mei
Institute of Vegetables and Flowers， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China
摘要 番茄黄化曲叶病毒病（Tomato yellow leaf curl virus disease，TY LCVD）是目前为害番茄生
产的重要病害，准确检测TYLCV 含量是深入研究该病毒致病机理以及抗病育种的基础。根据TYLCV 的
DNA 保守序列设计引物，基于SYBR Green I 检测模式，构建了TYLCV 实时荧光定量PCR 检测体系，并
且对接种病毒30 d 后的感病番茄植株中的TYLCV 进行检测。结果显示，1ng·μL-1 感病番茄总DNA 中
约含有3.47×106 个病毒拷贝。利用实时荧光定量PCR 法比普通PCR 法的灵敏度提高100 倍。
关键词 ：
番茄 ,
番茄黄化曲叶病毒 ,
实时荧光定量PCR
Abstract ：Tomato yellow leaf curl virus disease（TYLCVD）is one of the most devastating plant
diseases in the world．Accurate quantification of TYLCV is the foundation for further studying the
pathogenesis of this virus and also for resistance breeding．This paper constructed a real-time PCR
testing system to quantify TYLCV in tomato by the primer，designed on the conservative sequences of
TYLCV complete genome，and a testing mode based on SYBR Green I technology．The TYLCV were
detected in the infected tomatoes after 30 days post-inoculation，about 3.47×106 virus copies could be
detected in 1 ng·μL-1 total DNA in the infected tomato plants．This method is 100-fold more sensitive
than the traditional PCR.
Key words ：
Tomato
TYLCV
Real-time PCR
收稿日期: 2012-08-29
基金资助: 公益性行业（农业）科研专项经费项目（201003065），“948”项目（2011-Z3），农业部园艺作物生物学与种质创制
通讯作者:
胡鸿， 研究员， 硕士生导师， 专业方向： 蔬菜贮藏与质量控制，E-mail：
huhong@caas.cn
作者简介 : 林铭，硕士研究生，专业方向：蔬菜遗传育种，E-mail：linm55@126.com
引用本文:
林铭, 胡鸿, 杜永臣, 高建昌, 王孝宣, 国艳梅. 番茄黄化曲叶病毒的实时荧光定量PCR 检测[J]. 中国蔬菜, 2013, 1(2): 20-26.
LIN Ming, HU Hong, DU Yong-Chen, GAO Jian-Chang, WANG Xiao-Xuan, GUO Yan-Mei. Real-time PCR for Quantification of Tomato yellow leaf curl virus in Tomato
Plants. , 2013, 1(2): 20-26.
链接本文:
https://www.cnveg.org/CN/ 或 https://www.cnveg.org/CN/Y2013/V1/I2/20
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