王娇1,2☆,张斌2☆,吴元康2,杨丽梅2,庄木2,吕红豪2,王勇2,季家磊2,闫超1*,张扬勇2*
开花抑制因子FLOWERING LOCUS C(FLC)编码MADS-box 家族蛋白,在拟南芥的春化途径中起关键作用。为了探究甘蓝BoFLCs在春化过程中的作用,利用CRISPR/Cas9 技术对甘蓝自交系GL的BoFLCs基因进行编辑,显著提早了其开花时间,明确了BoFLCs的基因功能。以晚花甘蓝自交系20-2221(P1,BoFLCs-w)和中早花甘蓝自交系20-2229(P2,BoFLCs-z)为亲本,构建BC1-2P2和BC2F1分离群体。通过序列比对分析,发现BoFLC1、BoFLC3和BoFLC5在双亲间均存在序列差异,并根据这些差异序列开发了其特异性分子标记。利用BoFLCs 特异性分子标记对BC2F1群体进行筛选,最终获得1个包含BoFLC1-w/w、BoFLC5-w/w纯合单倍型以及BoFLC3-w/z杂合单倍型的植株(BC2F1-29),其抽薹时间和开花时间分别比回交亲本20-2229晚8.00 d和13.00 d;4个包含BoFLC1-w/w、BoFLC3-w/w纯合单倍型以及BoFLC5-w/z杂合单倍型的植株(BC2F1-55、BC2F1-119、BC2F1-121 和BC2F1-163),平均抽薹时间和开花时间比20-2229 分别晚9.75 d 和(13.50 d;3个包含BoFLC1-w/w、BoFLC3-w/w 和BoFLC5-w/w 纯合单倍型的植株(BC2F1-82、BC2F1-106 和BC2F1-192),平均抽薹时间和开花时间分别比20-2229 晚11.33 d 和15.67 d。本研究开发了BoFLCs 特异性分子标记,并实现了BoFLCs 优异基因型的高效聚合,改良了亲本20-2229 的抽薹性。