China Vegetables

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  • Received:2017-07-11 Online:2017-08-30 Published:2017-10-01

利用改良SOE-PCR 技术定点突变TuMV C4-VPg 基因

李国亮 钱 伟 张淑江 李 菲 章时蕃 张 慧 谢露露 武 剑 王晓武 孙日飞*   

  1. (中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京 100081)
  • 通讯作者: 孙日飞,研究员,博士生导师,专业方向:蔬菜遗传育种,E-mail:sunrifei@caas.cn
  • 作者简介:李国亮,博士研究生,专业方向:蔬菜遗传育种,E-mail:li_guo_liang@ 126.com
  • 基金资助:

    国家自然科学基金项目(31372069),“十二五”国家科技支
    撑计划项目(2013BAD01B04-03),农业部园艺作物生物学与种质创
    制重点实验室项目

摘要:

芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是白菜类蔬菜生产上的重要病害,其中TuMV VPg 基因在TuMV 侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用,且不同TuMV 株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以TuMV C4-VPg 基因序列为模板,定点突变TuMV C4-VPg 与TuMV CDN1-VPg 基因间5 个差异核苷酸位点(决定5个氨基酸差异)。结果表明:通过SOE-PCR 技术获得了5 个TuMV C4-VPg 基因的单点突变体,即TuMV C4-VPg-Ⅰ、TuMV C4-VPg-Ⅱ、TuMV C4-VPg-Ⅲ、TuMV C4-VPg- Ⅳ和TuMV C4-VPg-Ⅴ。

关键词: 白菜类蔬菜, 芜菁花叶病毒, VPg 基因, 重叠延伸PCR 技术, 单点突变